Краситель ДНК/РНК SafeGreen Stain, концентрация 10 000х
Краситель ДНК/РНК SafeGreen Stain — это флуоресцентный краситель нового поколения, разработанный для замены высокотоксичного бромистого этидия (EtBr). Он совместим с распространенными буферами для электрофореза, такими как TAE, TBE и RRB (быстрый электрофорезный буфер).
Краситель не искажает подвижность фрагментов ДНК в геле. При добавлении красителя непосредственно в гель перед проведением электрофореза фрагменты ДНК двигаются в соответствии со своей длиной. При этом SafeGreen демонстрирует более высокую чувствительность по сравнению с EtBr.
Окрашивание гелей SafeGreen совместимо с последующими процедурами, такими как экстракция ДНК из геля и клонирование. Краситель эффективно удаляется из ДНК с помощью фенол-хлороформной экстракции и осаждения этанолом.
В отличие от бромистого этидия (EtBr), который вызывает разрывы и ники в цепях ДНК, SafeGreen™ минимизирует такие повреждения, что приводит к более высокой эффективности трансформации и снижению частоты мутаций по сравнению с EtBr. Для еще лучших результатов клонирования рекомендуется визуализировать SafeGreen™ на трансиллюминаторах синего света, таких как SuperRay (APGENA GENOMICA, Москва).
SafeGreen поглощает синий свет с выраженным пиком поглощения около 440-520 нм и при этом имеет дополнительный пик поглощения УФ-излучения в диапазоне 250–300 нм с. Максимум эмиссии приходится на 525 нм. Краситель идеально подходит для визуализации с использованием трансиллюминаторов синего света, таких как система гельдокументации SuperRay (APGENA GENOMICA, Россия, Москва). Также, благодаря дополнительному спектру поглощения в ультрафиолетовой области, SafeGreen совместим с УФ-трансиллюминаторами с длиной волны 254 нм, хотя визуализация с их использованием и менее эффективна.
Концентрированный раствор красителя ДНК/РНК SafeGreen Stain 10,000X разбавляется в 10 000 раз для предварительного окрашивания гелей и в ~3300 раз для последующего окрашивания (согласно инструкциям ниже). Один флакон (0,5 мл) раствора 10,000X позволяет подготовить 100 мини-гелей для предварительного окрашивания или окрасить не менее 100 мини-гелей после проведения электрофореза. Соответственно, двух миллилитров раствора 10 000х достаточно для подготовки 400 мини-гелей
Характеристики
• Концентрация: 10 000Х (раствор в DMSO)
• Основной спектр поглощения: в синей области (совместим с трансиллюминаторами синего света)
• Дополнительный спектр поглощения: в УФ области (совместим с УФ трансиллюминаторами с длиной волны 254 нм)
• Максимум эмиссии: 525 нм
• Нижний предел чувствительности: от 0,2 нг до 0,6 нг на полосу ДНК в геле
• Термостабильность: допускается добавление в агарозный гель после расплавления, а также в смесь агарозы с буфером до проведения плавления
• Условия хранения: хранить при +4 °C, беречь от действия света. Хранение при –20 °C не допускается.
• Условия транспортировки: при комнатной температуре
• Срок хранения — 24 месяца при температуре +4 °С
Применение: только для исследовательских целей. Не предназначено для использования в медицинских или диагностических целях.
Литература
